多功能酶标仪 :具多种检测模式的单体台式酶标仪

更新时间:2024-09-20 22:49

多功能酶标仪,也称为多功能微孔板检测仪或多功能微孔板检测平台,能够对基于微孔板的实验进行多种不同模式的检测。这类仪器通常具备两种及以上检测功能,最少包括“吸收光”和“荧光”,而更高档次的型号还支持“化学发光”、“生物发光共振能量转移”、“时间分辨荧光”、“荧光偏振”等功能,甚至还能执行“Western Blot”和“上转换发光”等高级检测实验。

形态特征

多功能酶标仪是一种拥有多种检测模式的单体台式酶标仪。某些高端型号不仅支持微孔板上的吸光度(Abs)、荧光强度(FI)、时间分辨荧光(TRF)、荧光偏振(FP)和化学发光(Lum)检测,而且还支持1cm立式比色皿进行除吸光度之外的荧光强度和化学发光检测。

分类

功能分类

酶标仪可以根据其功能分为光吸收酶标仪、荧光酶标仪、化学发光酶标仪和多功能酶标仪。其中,光吸收酶标仪主要用于可见光和紫外光吸光度的检测,荧光酶标仪则用于荧光检测,化学发光酶标仪则是基于生物化学反应中的自发光特性进行检测。多功能酶标仪集成了前几种酶标仪的功能,能够同时进行光吸收、荧光和化学发光等多种检测。

滤光方式分类

酶标仪也可以根据其滤光方式进行分类,包括滤光片式酶标仪和光栅式酶标仪。前者通过滤光片轮选择特定波长进行分光,后者则采用光栅进行分光,能够获得任意波长的光。此外,根据通道数量,酶标仪还可以分为单通道和多通道两类,单通道又细分为自动和手动两种。

技术特点

1. 光栅和滤光片技术:基于滤光片系统的高灵敏度检测和基于光栅系统的高灵活度检测。

2. 检测模式:包括荧光强度检测(FI)、荧光偏振检测(FP)、时间分辨荧光检测(TRF)、TR-FRET、高性能发光检测、紫外/可见吸收光、AlphaScreen / AlphaLISA、Western Blot等。

3. 兼容微量检测板:可进行体积为2 μL或4μL的检测,最多可同时处理60多个微量样品。

4. 光栅型单色器系统及带宽可调:光路集成光栅单色器,实现波长连续可调,且加入可变带宽设计增加检测灵活性。

5. 可结合滤光片系统:滤光片显著提高多种检测功能的灵敏度。

主要参数

1. 光密度测读模式:波长范围230~1000nm,精确选择波长1nm;带宽4 nm;波长准确度±2.0nm;波长重现性±1.0nm;测读范围0~4.0 OD;光分辨度0.001 OD;测读准确度(微孔板)\u003c ±0.010 OD ±1.0%;(比色杯)\u003c ±0.010 OD ±1.0%;测读精确度\u003c ±0.003 OD ±1.0%;杂散光0.05% @ 230 nm;微孔板测读时间96: 18 秒384: 49 秒;温度范围室温+4~45度。

2. 时间分辨荧光法(TRF):波长范围滤光片: 波长可随意定制,光栅: 250 - 850 nm,步进1nm;数据采集可调;测读次数1~100flashes;测读延迟0~600usec;读取数据积分时间50~1500usec;带宽9nm, 15nm,25nm;灵敏度10fM/孔 铕元素(96孔顶读模式);读取速度96孔板17秒,384孔48秒。

3. 荧光偏振(FL):波长选择方式光栅全波长(顶部)或深部阻挡滤光片(顶部);波长范围300 - 750 nm;检测灵敏度3nM荧光素/孔时,\u003c5mp SD;读取速度96孔板42秒,384孔123秒。

4. 化学发光模式(Lum):连续波长范围300~850nm;灵敏度8amol ATP(384孔顶读模式);读取速度96孔板120秒,384孔420秒;光交叉\u003c0.4%。

应用领域

1. 脱氧核糖核酸/核糖核酸/蛋白质测试及定量。

2. 所有微孔板的ELISAs、酶动力学,测试药物解离代谢测试。

3. 细胞毒及细胞发育、死亡测试。

4. Caspase-3 以及蛋白酶测试。

5. cAMP的结合位点测试。

6. IMAP激酶测试(激酶药物筛选)。

7. Intrinsic 色氨酸荧光测试。

8. 绿色荧光蛋白的测试。

9. FRET(荧光能量转移) and TR-FRET(时间分辨的荧光能量转移,针对快释放性小含量受体的检测)测试。

10. HTRF 测试 (M5e only)。

11. ADME-Tox(药物吸收,分布,代谢和排泄和毒性阵列)测试。

12. 亲油性基团测试。

13. 人血球蛋白结合测试。

14. 膜渗透测试(PAMPA平行人造膜透性组合)。

15. 溶解度测试。

16. 体外细胞侵袭培养系统测试。

17. Delfia(分布镧系荧光免疫分析)测试。

使用方法

首先将抗原(或抗体)物质吸附(医学上称“包被”)在样品盘中(国际上通用的样品盘是96 标准微孔反应板);再将待测样品(如血液、体液等)加入样品盘;于是待测未知的抗体(或抗原)与包被的抗原(或抗体)相结合,成为抗体抗原配位化合物。当依次加入酶结合物(即酶标记抗体或酶标记抗原)和酶的底物时便产生呈色反应,呈色程度与被检测样品中待测抗体(或抗原)的量相关,据此就可以得出定性或定量的检测结果。

用途

酶标仪是一种用途广泛的生物检验医疗设备,利用酶联免疫分析法,根据酶标记原理,根据呈色物的有、无和呈色深浅进行定性或定量分析。这是一种极具生命力的免疫学技术。可用于单克隆抗体筛分、凝血分、抗生素灵敏度检验,以及其它需要进行比色的分析工作中。该仪器适用于临床检验、微生物学、流行病学、免疫学、内分泌学以及农林科学等领域。广泛用于医院、血站、防疫站、生物制品等部门。我国卫生行政主管部门已明确规定,对多发常见的肝炎病诊断,不能用目测进行,必须用酶标仪判断。没有酶标仪或不用酶标仪的医院不能上等级,也没有判断肝炎的资格和权利。对于有蔓延趋势的艾滋病毒的判断,必须建立专门的艾滋病实验室并采用酶标仪进行判断。

参考资料

多功能酶标仪.TECAN.2024-09-18

多功能酶标仪.美谷分子仪器有限公司.2024-09-18

浅谈多功能酶标仪选择的要素.丁香实验.2024-09-18

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