核苷类 :具有生理活性的水溶性成分

更新时间:2023-10-19 10:36

核苷类是一类具有广泛生理活性的水溶性成分。在灵芝的研究中,已知其含有多种核苷类化合物,如灵芝嘌呤等。这些化合物可以通过特定的方法从灵芝中提取出来,并且在临床医学中有一定的应用价值。

物理性质

核苷类化合物通常具有良好的水溶性和广泛的生理活性。它们可以从植物或真菌中提取出来,如灵芝中的核苷类化合物。

化学结构

核苷类化合物包括腺嘌呤、腺嘌呤核苷、灵芝嘌呤等多种类型。这些化合物的结构复杂多样,具体结构可通过化学分析手段确定。

提取方法

核苷类化合物的提取一般涉及多步过程。首先,使用乙醇提取灵芝菌丝体,然后浓缩并溶于水中。接着,利用乙醚和乙酸乙酯进行萃取,随后通过阳离子树脂处理。经过大孔树脂色谱,可以得到尿嘧啶核苷、尿嘧啶等产物。对于某些特殊的核苷类化合物,如灵芝嘌呤,可能需要额外的纯化步骤来获得高纯度的产品。

应用

核苷类化合物在临床上有一定的应用价值。例如,由赤芝孢子粉和薄盖灵芝菌丝体制成的增肌注射液被用于治疗进行性肌营养不良和萎缩性肌强直等疾病。此外,一些研究还表明,核苷类化合物如尿嘧啶和尿嘧啶核苷能够降低实验性肌强直症小鼠血清醛缩酶水平。而腺嘌呤核苷则显示出较强的抑制血小板凝集的能力以及镇静、抗缺氧和促进心肌组织摄取放射性同位素86Rb的作用。

药物分析

方法名称

四维灵芝液—核苷类成分的测定—高效毛细管电泳法

应用范围

本方法采用高效毛细管电泳法测定四维灵芝液中的核苷类成分腺苷及鸟苷的含量。本方法适用于四维灵芝液。

原理

取供试品,离心取上清液,加于处理好的大孔吸附树脂上,依次以水、30%乙醇洗脱,收集30%乙醇部分,水浴上蒸干,残渣以水溶解定容,摇匀,过0.45μm微孔滤膜,滤液作为供试品溶液,注入高效毛细管电泳仪进行电泳分离,用紫外检测器检测腺苷及鸟苷的相应值,计算其含量。

试剂

- 乙醇

- 硼砂

- 十二烷基磺酸钠(SDS)

仪器设备

- 高效毛细管电泳仪

- 熔融石英毛细管柱(75μm×57cm,有效柱长50cm)

- 紫外检测器

分离条件

- 运行缓冲液:20nmol/L硼砂(含30mmol/LSDS,pH 10.0) 95%乙醇 = 95 5

- 气动进样:20psi, 15s

- 柱温:20℃

- 检测波长:254nm

试样制备

称取供试品

精密量取四维灵芝液20mL。

对照品储备溶液的制备

精密称取腺苷及鸟苷适量,用水为溶剂配制成浓度为0.1mg/L的对照品储备溶液。

内标溶液的制备

精密称取内标磺胺甲恶唑适量,用水为溶剂配制成浓度为0.2mg/L的内标溶液

标准溶液的制备

精密吸取对照品储备溶液各0.1、0.3、0.5、0.7、1.0、2.0mL,置于5mL量瓶中,各加入内标1mL,加水至刻度,摇匀,得系列浓度的标准溶液。

供试品溶液的制备

取供试品,离心取上清液,加于处理好的大孔吸附树脂小柱(1.5×11cm)上,依次以水50mL、30%乙醇100mL洗脱,收集30%乙醇部分,水浴上蒸干,残渣以水溶解定量转移至5mL量瓶中,加内标液1mL,加水至刻度,摇匀,过0.45μm微孔滤膜,滤液作为供试品溶液,

注:“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

操作步骤

标准曲线的绘制

上述系列浓度标准溶液分别注入高效毛细管电泳仪进行电泳分离,以紫外检测器检测,检测波长为254nm,将腺苷及鸟苷的浓度对其峰面积与内标峰面积比绘制标准曲线,进行线性回归,得到回归方程。

供试品的测定

上述供试品溶液注入高效毛细管电泳仪进行电泳分离,以紫外检测器检测,检测波长为254nm,记录腺苷及鸟苷的相应值,计算其含量。

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