根癌农杆菌 :高效敏感型生物检测菌株

更新时间:2024-09-20 20:18

根癌农杆菌是一种高效敏感型生物检测菌株,检测群体感应信号,自体诱导物用β-半乳糖酶法进行检测。最适生长温度28℃;在营养琼脂培养基上生长,在AT培养基上做检测 庆大霉素100μg/ml,四环素(2μg/ml),大观霉素100μg/ml 做检测的时候,温度不要超过28℃,培养时间不应超过48小时,在X-Gal 的ABM培养基上有蓝色产生。

正文

根癌农杆菌介导方法获得了许多转基因植株,由于番薯本身的特性致使部分甘薯的遗传转化受到限制,但在研究过程中可根据不同甘薯品种选择不同的受体、条件,用根癌农杆菌介导的方法也获得了成功。综述了根癌农杆菌介导法的转化机理及影响根癌农杆菌转化甘薯效率的诸多因素,如:植物基因型、转化受体、菌液浓度、选择标记等,以及采用遗传工程技术改良甘薯品种的进展。

介绍

利用根癌农杆菌介导法将CHS基因导入地被菊花,获得了抗性植株。经过PCR、PCR-Southern、Southern等分子生物学技术检测,获得了6株转基因植株。将转CHS基因植株(编号依次为:05,08,32,33,42,48)与非转基因地被菊花苗生长进行比较,发现生长情况基本一致,株高(cm)、冠幅(cm)、节数、节间(cm)、叶长(cm)、叶宽(cm)、叶长/叶宽、花数、花径(cm)、重瓣性等方面差异均不显著,植株仍可以保持原有的优良性状。

本发明涉及根癌农杆菌介导的顶头孢霉的转化。本发明提供了构建适用于头孢菌素C产生菌顶头孢霉基因工程研究用的新型载体质粒,并建立了根癌农杆菌Ti质粒介导的转化顶头孢霉的新方法,无论是用菌丝体或是原生质体,每107个受体细胞都可得到>100个转化子,与传统的原生质体转化法1~4个转化子相比,转化率得到了明显的提高。有望突破现有载体转化顶头孢霉效率率低这一瓶颈,促进这个重要的工业微生物菌种的基因工程改良,具有极大的工业价值。

参考资料

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