饱和酚 :化合物

更新时间:2024-09-20 13:59

饱和酚在核酸纯化中有2种,一种为Tris饱和酚(pH7.8左右),故也称为碱性酚。另一种就是酸性酚,也就是水饱和酚。

基本介绍

市售酚中含有等氧化物,这些产物可引起磷酸二键的断裂及导致核糖核酸脱氧核糖核酸的交联,应在160℃用冷凝管进行重蒸。重蒸酚加入0.1%的8-羟基啉(作为抗氧化剂),并用等体积的0.5mol/L 三羟甲基氨基甲烷·Cl (pH8.0)和0.1mol/L Tris·Cl(pH8.0)缓冲液反复抽提使之饱和并使其pH值达到7.6以上,为Tris饱和酚(pH7.8左右)。

用于RNA提取时,则要制备酸性酚,也就是水饱和酚,因为在酸性条件下,RNA被分配于水相,而DNA在有机相,从而达到分离获得RNA的目的。水饱和酚同时能使蛋白质变性、沉淀,从核酸提取液中将蛋白质分离除去。因此,pH值不同,应用不同,切不可弄混,以免造成实验失败。

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